從混雜微生物群體中獲得只含有某一種微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。
1. 利用固體培養(yǎng)基分離
微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的單個(gè)菌落，通常是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體，因此可通過(guò)挑取單菌落而獲得一種純培養(yǎng)。在平板上的單個(gè)菌落并不一定保證是純培養(yǎng)，因此，純培養(yǎng)的確定除觀察其菌落特征外，還要結(jié)合顯微鏡檢測(cè)個(gè)體形態(tài)特征后才能確定。有些微生物的純培養(yǎng)要經(jīng)過(guò)一系列分離與純化過(guò)程和多種特征鑒定才能得到。
（1）稀釋傾注平板法
先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 …），然后分別取不同稀釋液少許，與已熔化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合，搖勻后，傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中，待瓊脂凝固后，制成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可看出菌落。如果稀釋得當(dāng)，在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)**細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落，或重復(fù)以上操作數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)。
（2）涂布平板法
將含菌的樣品加入還比較燙的瓊脂培養(yǎng)基，再倒平板，易造成某些熱敏感菌的死亡，某些好氧菌會(huì)在瓊脂中間缺氧影響生長(zhǎng)。
2. 用液體培養(yǎng)基分離純培養(yǎng)
連續(xù)稀釋，使一只試管里分配不到一個(gè)微生物。如果大多數(shù)平行稀釋管里沒(méi)有微生物生長(zhǎng)，那么有微生物生長(zhǎng)的試管得到的培養(yǎng)物就是純培養(yǎng)物。
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